微生物实习报告

微生物实习报告

在经济飞速发展的今天，报告的适用范围越来越广泛，不同种类的报告具有不同的用途。那么一般报告是怎么写的呢？以下是小编为大家收集的微生物实习报告，仅供参考，欢迎大家阅读。

岁月如梭，光阴似箭，不知不觉在微生物室实习的时间已经结束了，但收获颇丰。 通过积极协助老师完成细菌学方面检验项目的同时，自己的基础操作能力有了很大程度的提高，操作起来熟练了非常多。而且通过染色在显微镜下能辨认的细菌也更多了，像球菌科的葡萄球菌感染、链球菌、淋球菌以及杆菌科的肠杆菌，真菌孢子在显微镜下也能一眼辨认；全片查找结核杆菌的阳性率也提高了。

对什么类型的标本应做什么平板接种，培养温度等也有了进一步的掌握，比如：痰标本应接种在血平板，巧克力平板，沙保平板而且还要做涂片染色以监测痰标本的合格程度。血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的.基础菌群的生长状态，沙保主要观察是否有念珠菌生长。

总之在微生物一个月的实习日子里感觉自己受教颇多，通过亲身实践操作把自己在学校学到的理论知识同实践很好的结合了起来，在带教老师的悉心指导下已熟悉掌握了各类标本的接种、细菌培养以及细菌的初步鉴定、细菌的药敏试验等。

1、目的

通过实习使学生将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解基础理论，提高学生的综合能力与创新意识。通过实习，掌握培养基的配制、分装及灭菌方法；掌握微生物的接种技术；掌握微生物的冷冻干燥保藏方法。

2、要求

（1）注重微生物学基础实验技能的掌握与提高，克服盲目追求新颖而忽视基础的倾向；

（2）课程实习前要预习，明确每次实验的目的与基本步骤；

（3）在实验中要有严紧的科学态度，尊重事实与实验结果，要善于发现新现象；

（4）树立密切合作的风气，包括学生与老师、班与班、组与组、组长与组员之间的密切配合。

二、实习内容

1、培养基的配制和灭菌。

2、微生物（金葡菌）的接种。

3、菌种的（金葡菌）的冷冻干燥保藏方法。

4、日程安排：

第一天实习课程的讲授；实习工具、仪器和设备的准备（包括培养基的配制、倒平板、金葡菌的活化、保护剂的配制）。

第二天金葡菌由固体培养基转接至液体培养基；准备第三天的.实验器具。第三天菌种冻干前的预处理。第四天菌种的冻干操作。第五天冻干机关机，菌种保藏。

三、主要材料和仪器设备

天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、分装架、移液枪、培养皿、玻璃棒、烧杯、试管架、剪刀、酒精灯、硅胶塞、线绳、报

纸、乳胶管、电炉、高压灭菌锅、干燥箱、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、金葡菌斜面培养物、接种环、冻干机、西林瓶、离心机、生化培养箱等。

四、操作方法

1.制备培养基

2.配制保护剂：鲜牛奶3000r/min离心30min，弃去上层脂肪，加9倍体积生理盐水，分装，121℃(或116℃)高压灭菌20min后备用。保护剂的作用可能是在冷冻干燥的脱水过程中代替结合水而稳定细胞成分(细胞膜)的构型，防止细胞膜因为冻结而破坏。保护剂还可以起支持作用，使微生物疏松地固定在上面。

3.包2根离心管、4根大枪头、2个西林瓶、1根8ml生理盐水、1根保护剂，121℃灭菌20min。

4.把菌种从平板培养物接种至平板培养基（菌种的活化）：

（1）把接种环放在酒精灯上消毒，消毒时应使接种环完全烧红；

（2）待接种环冷却后，用接种环从平板上沾取少许菌苔；

（3）然后用接种环在平板培养基上画线；

（4）把平板培养基拿去37℃培养24h

5.把菌种从平板培养物接种至液体培养基（液体接种法）：

（1）用接种环从平板上沾取少许菌苔；

（2）在管内靠近液面试管壁上将菌苔轻轻研磨并轻轻振荡，或将接种环在液体内振摇几次；

（3）将液体肉汤培养基150r/min摇床37℃培养24h。

接种液体培养物时应特别注意勿使菌液溅在工作台上或其他器皿上，以免造成污染。如有溅污，可用酒精棉球灼烧灭菌后，再用消毒液擦净。凡吸过菌液的吸管或滴管，应立即放入盛有消毒液的容器内。

6.把灭菌物品烘干备用

7.拿出液体培养基：取出5ml菌液放入无菌离心管4000r/min离心20min，倾去上清液，再用5ml无菌生理盐水将菌泥重新悬浮，再次4000r/min离心20min，倾去上清液，用5ml灭菌保护剂将菌泥重新悬浮，之后就可以分装入西林瓶，每瓶1ml(液面高度3～5mm)。

8.预冻：分装好的菌种管放－80℃预冻2h，同时开启冻干机的制冷机，也可在冻干机的冷阱中预冻菌种。

9.冻干：当冻干机冷阱温度达到－40℃时，将预冻好的西林瓶放进压盖干燥架中，

把假盖板放在冷阱上，再将干燥架放在冷阱上方，罩上压盖有机玻璃罩，罩下端要与“O”型密封圈完全接触。顺时针拧紧真空阀，按“真空计”键，显示真空度为100～110×103，再按“真空泵”键，真空泵工作（真空泵的盖子要打开），15Pa以下为正常，冻干开始。10.压盖：24h后，视感物料已完全干燥，按顺时针方向转动有机玻璃罩上方手柄，使罩中压盖架丝杠转动下移，将瓶盖压入瓶中，实现在真空中压盖。

11.关机：按逆时针方向打开真空阀充气，按“真空泵”键，真空泵停止运转。取下有机玻璃罩，拿出西林瓶保存。

五、注意事项

需灭菌的物品应严格灭菌，避免污染杂菌；2.接种时应该要等接种环完全冷却后再接种；

3.冻干时，西林瓶的盖子一定要放好，即使西林瓶中的空气可以出来形成真空，又能在压盖的时候可以把盖子盖好。

六、实习结果

上图中盖子已经掉了的和西林瓶中还是液体的都是实验失败的，盖子即没掉瓶子中的菌种又是粉末状的为实验成功的。

盖子掉了的：是因为抽气时，气流流动使瓶子掉下来。

瓶子中还是液体的：是因为盖子盖的太紧，瓶中的空气抽不出来，水分也没抽出，导致瓶子中的菌种未变成粉末状。

七、实习总结或体会

通过这个实习，掌握了培养基的配制、分装及灭菌方法；掌握了微生物的接种技术；掌握了微生物的冷冻干燥保藏方法。通过实习将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解基础理论，明白了需灭菌的物品应严格灭菌，避免污染杂。也让我的综合能力与创新意识得到了提高。

姓名：初旭

……此处隐藏9473个字……滤液加入琼脂，加热溶解后放入糖，搅拌使它溶解，补水至设定值。

4、糖产酸产气培养基：营养物（0.5%牛肉膏，1%蛋白胨，0.3%氯化

钠，0.2%磷酸氢钠，0.2%溴麝香草酚蓝）配方为20g/1000ml，蒸馏水配制，pH7.4。分装后加葡萄糖0.5%。

5、硝酸盐生化实验培养基：0.3%牛肉浸膏，0.5%-1%蛋白胨，pH7.0（100ml 培养基加入1g硝酸钾）

6、糖发酵实验培养基：营养物（0.5%牛肉膏，1%蛋白胨，0.3%氯化钠， 0.2%磷酸氢钠，0.2%溴麝香草酚蓝）配方为20g/1000ml，蒸馏水配制，pH7.4。分装后加乳糖0.5%。

制备：由于第6种培养基同第4种培养基，则一组配制即可，再加上无菌水，共需制备六种，则将全班分成六个组，我们为第4组，故配制过程如下：

（1）天平调平。

（2）准确秤取7.8g营养物（配390ml），葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。

（3）将营养物放入搪瓷缸中，加入390ml蒸馏水，玻璃棒搅拌将其溶解。

（4）pH试纸测其pH是否为7.4，若不是，用氢氧化钠溶液调到7.4。分装：

（1）取三个250ml锥形瓶，每个锥形瓶中倒入130ml的上述溶液。

（2）将上述称好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分别倒入三个锥形瓶中，摇晃锥形瓶使其溶解。

（3）将加入糖的营养液分别装入12个试管中，每个试管用移液管放入10ml。

（4）将每两个葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮纸扎成一捆，即每6个试管扎成一捆，写上班级、组别后待灭菌。

灭菌：将已经包扎好的试管放入灭菌箱中，进行灭菌待用。

以上就是我们组的制备过程，在这个过程中应该注意以下几点：

1、称量前天平要调平。

2、秤取营养物时应准确秤取。

3、溶解后注意调pH值到7.4

4、量取培养液时要准确，特别是向试管中分装时要用移液管。

2.2 酵母菌的分离（详述分离方法，培养条件及观察到的菌落结果）

步骤过程：

1、倒平板：待YPD培养基冷却至50度左右后，按无菌操作法倒12只平板（每皿约倒15ml），平置，待凝。

2、酵母菌稀释：取1mL菌悬液放入装有99ml的无菌水锥形瓶中，摇匀后再从锥形瓶中取1mL放入1号管，依次进行，则管里酵母的浓度依次是10-2~10-7。

3、平板分离：依次从10-7，10-6，10-5的管里取稀释液进行涂布平板，YPD平板每个浓度涂两个。

4、划线法分离：用接种环从酵母斜面上取一环酵母，在酒精灯前按无菌操作法进行划线，将酵母接种于6个平板中。

5、恒温培养：将12个培养皿平板置于30℃恒温箱中培养24~48小时。 结果：

观察菌落：出现了4种不同形态的菌落。

①圆形，菌落大，表面光滑，湿润，突起，乳白色。

②圆形，菌落略小，湿润，突起，质地均匀，呈乳白色。

③椭圆形，菌落略小，湿润，突起，颜色均一，呈乳白色。

④椭圆形，菌落大，湿润，突起，颜色均一，呈乳白色。

结果分析：

通过网上查阅资料显示，正常条件下大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似，但比细菌菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落多为乳白色，少数为红色，个别为黑色。 啤酒酵母的菌落红酵母的菌落各种酵母菌的菌落。

将我们观察的结果与资料相比，确实符合大多数酵母菌的菌落形态。 结论：观察到的是酵母菌落。

2.3酵母菌的初步鉴定（包括革兰氏染色和糖代谢实验）

2.3.1将平板上分离到的各菌株进行简单染色后进行镜检

观察结果为：

球菌，各个细胞的形状比较规整。

结论：

通过菌体个体形态和菌落形态，初步确定出了一株酵母菌。

注意事项：

1、搬动显微镜时应一手握住镜臂，另一手托住底座，镜身保持直立，并紧靠身体，步态稳健。切记单手拎提，以免目镜头从镜筒上掉出而砸坏。

2、各个镜面切忌用手涂抹，以免手上的油、汗污染镜面，造成发霉、腐蚀。

2.3.2 将初步确定的菌株进行生化实验

步骤过程：

用接种环从平板上挑取已分离的同一菌落接种于糖发酵管和硝酸盐生化管中，接种完后30℃培养。24小时后观察结果。

与此同时，将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基（PDA），30度培养48小时后，4度冷藏，待检其他特性。

结果：

验中并没有观察到，但硝酸盐管中变黄，则分析结果，可能是酵母菌生长不旺盛，导致即使产气也看不出来。

根据这一现象，能够说明该菌株具有产酸产气性能，确定此菌株确实是酵母菌。

3、发酵产酯实验（11.23-11.24）

步骤过程：

（1）准确吸取25ml发酵液于250ml锥形瓶中，加入25ml蒸馏水，滴2滴酚酞指示剂，用0.1mol/L的氢氧化钠滴至微红色，记下消耗氢氧化钠溶液的体积。

（2）将滴定后的发酵液转移至250ml锥形瓶中，准确加入15ml上述氢氧化钠标液，接上冷凝管，加热至沸回流30min。

（3）取下冷却至室温，完全转移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的盐酸溶液滴定至微红色刚好消失，纪录盐酸溶液的用量，记录总酯的含量。 结果：

氢氧化钠消耗体积：V1=1.9ml

盐酸消耗体积：V2>15ml

分析与结论：氢氧化钠消耗体积1.9ml用来预估总酯含量，且其越大则总酯越少。由此可见，产酯量应该不少。

按公式：总酯=（15-V2） X0.1X10-3mol 但是我们滴到18ml仍不见结果，并且没有要到微红的迹象。可能是由于配制实验试剂时出现问题，导致没有测出总酯量。

五、总结

短短一周的微生物实习在紧张又有效率的节奏下顺利的结束了。这是我们自己在老师协助下并亲自动手连续完成的一些列实验，在其中感受到了很多平时和课上很少遇到的东西，有自主，有探索，有反思，有合作

短暂的实习转眼而过，回顾实习生活，我在实习的过程中，既有收获的喜悦，也有一些遗憾。喜悦是我们都在老师的指导下自主设计了方案并分工鲜明，合理掌握每一步实验用时及时、准确测量数据，最终都得到了相应的结果。而遗憾那就是对实验有些方面的认识仅仅停留在表面，只是在看人做，听人讲如何做，未能够亲身感受、具体处理一些工作，所以未能领会其精髓。但时通过实习，加深了我对实验和微生物基本知识的理解，丰富了我的微生物实验的知识，使我对实验有了深层次的感性和理性认识。认识到要做好实验，既要注重理论知识的学习，更重要的是要把实践与理论两者紧密相结合。更进一步体会到了“实践是最好的老师”的深刻意义。